圖1  悟空K2025二維液相色譜系統

圖2  在線固相萃取-二維高效液相色譜法同時分析V_A、V_D、V_E閥切換示意圖

表1  二維液相系統色譜條件

圖3  混合標準溶液連續(xù)進樣6針疊加色譜圖

注：1：VA；2：δ-VE；3：β-VE；4：γ-VE；5：α-VE；6：VD₂；7：VD₃

對V_A、V_D、V_E混合標準溶液進行測試及重復性考察（圖3），三種維生素均具有極佳的峰形；如表2所示，β-VE和γ-VE的分離度為1.76，VD₂和VD₃的分離度為2.35，均可實現良好分離。如表3所示，三種維生素保留時間RSD均≤0.09 %，峰面積的RSD均≤0.72 %，具有良好的定性定量重復性。

標準品的V_A、V_D、V_E在其線性濃度范圍內均呈現良好的線性關系，相關系數R均≥0.9999。

圖4 嬰幼兒配方奶粉樣品一維和二維色譜圖

注：1：VA；2：δ-VE；3：β-VE；4：γ-VE；5：α-VE；6：VD₂；7：VD₃

嬰幼兒配方奶粉試樣中V_A、V_D、V_E的含量范圍為0.0 mg/100g~10 mg/100g；兩次獨立測定結果的相對偏差范圍為-0.85 %~4.58 %，滿足《T/SHFCA 002-2024 特殊醫(yī)學用途配方食品中維生素A、D、E的測定 在線固相萃取-二維液相色譜法》中規(guī)定的在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算數平均值的15%的要求；加標回收實驗中， V_A、V_D、V_E的回收率范圍為98.0 %~106.0 %。